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多模式超高分辨率系统

多模式超高分辨率系统

详细说明

多模式扫描仪:

1.360°TIRF全内反射荧光

均匀照明TIRF

当激光束聚焦在物镜的后部并以圆形旋转时,该圆形的每个点在盖玻片上产生具有相同入射角的平行光束。因此,在TIRF中对于固定波长,从每个点产生的消逝波具有相同的穿透深度。然而,干涉引起的杂讯号形状取决于波束的方位角。能够在相机的曝光时间期间非常快速地旋转激光束,模糊条纹或环形图案,提高图像均匀性。

超快入射角/ TIRF穿透自动化

基于电流计的自动化控制元件能够在不到一毫秒的时间内能够改变TIRF穿透深度,使其与“叠加”流采集兼容。甚至可以进行复杂的多色宽场/ TIRF实验。

多波长/波长校正

快速自动化可用于校正其波长依赖性的穿透深度。高级采集功能可用于即使在不同的几个通道并且不同的穿透深度同时成像。

全内反射荧光(360°TIRF)显微镜是观察紧贴盖玻片表面的样本的理想技术,因为它提供了最高的轴向分辨率(根据入射角在60到300nm之间)。 这种技术涵盖了很多的应用领域,如单分子跟踪,分泌过程成像,细胞膜与基质组分或肌动蛋白丝行为的相互作用

旋转360°TIRF和快速角度机动化

同时多波长TIRF与穿透深度调整

无与伦比的照明均匀性


2.HiLo

压制至极低背景

需要更低的照明激发

接近盖玻片光学切片

不需要宽场光源

使用倾斜照明以降低由聚焦平面产生的背景模糊并增强激发照明(暗场激光照明)。 因此,用户获得高图像质量和实现较少的激发功率与较少的观察漂白或实现更快的采集速率。 斜照明切片是暗场激光照明的延伸。 对于高入射角但小于临界角,起始TIRF范围,穿过样品的激发光束角度非常高,使得照射到达样品的厚度非常薄(约2μm)


3.Super resoultion localization microscopy超高分辨率单分子定位显微镜(即PALM,STORM,...)

TIRF或宽场模式

低背景,以便更完善地进行图像采集

单分子检测和低信号跟踪是非常苛刻的技术。 两者都需要高性能成像能力以及在激发和发射时的优质光学质量。扫描器提供产生宽场激光照明(宽场,倾斜或TIRF)的能力,同时它显著地改善照明均匀性。 因此,激发和检测的时候不会被随机条纹图案影响,并且在高分辨率重建图像上避免伪像

Molecular Devices的MetaMorph®超高分辨率软件提供了控制实验硬件,捕获图像序列,执行定位计算和实时显示超高分辨率图像的方法。 MetaMorph超高分辨率软件目前与许多品牌的激光发射器以及TIRF光学器件一起使用,并且可以与MetaMorph软件兼容的成像系统上使用。

MetaMorph超分辨率软件允许:

•小波滤波和高斯拟合

•使用散光的3-D定位

•任何CCD帧速率的实时超高分辨率图像显示

•离线处理

•使用基准标记进行漂移校正

•超分辨率图像的可变缩放

•自动阈值化和分离紧密分布的分子

•用于数据导出的单分子定位导出文本文档

•图像堆栈采集

•任意获取的图像大小


4.FRAP荧光漂白恢复/Photoactivation光活化

•基于电流计控制反射镜扫描,20kHz矢量模式扫描

动态光扰动

自动校准算法

快速多ROI /点定位

激光局部作用技术,如荧光恢复后光漂白(FRAP,FLIP),光激活,解笼锁,光蚀刻是非常强大的光操纵工具对于细胞组织或分析细胞内动力学蛋白质和其他大分子复合物。例如,FRAP允许通过漂白所选区域中的荧光来干扰稳态荧光分布。在漂白步骤后,研究人员可以观察和分析荧光分布如何返回到相同或不同的稳态,给出对活体样品的一个特定位点内感兴趣的分子的时空半衰期的评价。光活化或光转化利用光转化探针,允许形态学“脉冲和追踪”实验。

该系统提供了一个易于使用的界面来控制激光,设置ROI和计划实验。为了减轻采集过程并提高转向速度,它由自己的电子驱动。矢量扫描和实时动作模式提供测量最快现象的能力。用户可以漂白快速移动的结构,并分析他们的恢复,因为系统包含快速扫描和实时跟踪的算法功能


5.Ablation细胞消融

使用355nm脉冲激光通过直接耦合到扫描仪用于组织微量或细胞消融。 激光显微切割过程不改变或损害周围细胞的形态和化学性质


主要应用

 - TIRF膜蛋白或表面结合分子的成像

 - 分子扩散,结合和交换研究

 - 光遗传学,光活化和光转化

 - DNA诱导损伤

 - 激光微切割


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